日東精工原三菱卡爾費休試劑主要按組元分為單組元，雙組元和混合型、對瓶卡爾費休試劑。
（1）配制 稱取碘(置硫酸干燥器內48小時以上)110g，置干燥的具塞錐形瓶中，加無水吡啶160ml,注意冷卻，振搖至碘全部溶解后，加無水甲醇300ml，稱定重量，將錐形瓶置冰浴中冷卻，在避免空氣中水分侵入的條件下，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g，再加無水甲醇使成1000ml，密塞，搖勻，在暗處放置24小時。本液應遮光，密封，置陰涼干燥處保存。臨用前應標定濃度。
（2）標定 用卡爾·費休氏水分測定儀直接標定；或取干燥的具塞玻瓶，精密稱入重蒸餾水約30mg，加無水甲醇2——5ml，用本液滴定至溶液由淺黃色變為紅棕色，或用永停滴定法（附錄Ⅶ A）指示終點；另作空白試驗，按下式計算：
WF＝A——B式中F為每1ml費休氏試液相當于水的重量（mg）；W為稱取重蒸餾水的重量（mg）；A為滴定所消耗費休氏試液的體積（ml）；B為空白所消耗費休氏試液的體積（ml）。由于該方法制備試劑使用的有機堿是有惡臭氣味和毒性較大的吡啶，它會對試驗者的身體健康造成危害并且嚴重污染實驗室的環境。
日東精工原三菱卡爾費休試劑中含有分子碘而呈深褐色,當含有水的試劑或樣品加入后,由于化學反應,生成甲基硫酸吡啶(C5H5N·HSO4CH3)而使溶液變成黃色,可用目測法判斷終點（即由淺黃色變成橙色）。或用“永停滴定法”來指示卡氏反應的終點，其原理為：在反應溶液中插入雙鉑電極，在兩電極之間加上一固定的電壓，若溶劑中有水存在時，則溶液中不會有電對存在，溶液不導電；當反應到達終點時，溶液中存在I2和I-電對。
因此，溶液的導電性會突然增大，在設有外加電壓的雙鉑電極之間的電流值突然增大，并且穩定在我們事先設定一個閾值上面，即可判斷到了滴定終點，儀器便會自動停止滴定，從而通過消耗日東精工原三菱卡爾費休試劑的體積計算出樣品的含水量。
